潔凈室檢測-潔凈度沉降菌測試 采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物性粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度，本方法采用。GB/T 16294-2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法》進(jìn)行。

潔凈室檢測-潔凈度沉降菌測試 測試狀態(tài)

1、沉降菌測試前被測試潔凈室已經(jīng)過消毒。

2、測試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告中（原始記錄）中注明測試狀態(tài)。

3 測試人員

3.1 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。

3.2 靜態(tài)測試時(shí)，室內(nèi)測試人員不得多于2人。

4 培養(yǎng)基

4.1 培養(yǎng)基用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基或沙氏培養(yǎng)基。

4.2 培養(yǎng)皿一般采用 Ф90mm×15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿。測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。

4.3 將培養(yǎng)基按要求配制加熱熔化后，分裝、滅菌。冷卻至60℃時(shí)，在無菌操作要求下傾注約20ml至無菌平皿中。加蓋后在室溫放至凝固。

4.4 制備好的培養(yǎng)基平皿在 2～8 ℃保存，一般以一周為宜。

5 測試時(shí)間

測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min以后開始。

6 測試點(diǎn)和記錄

6.1 測試點(diǎn)按附錄《沉降菌測試點(diǎn)分布圖》。

6.2 測試點(diǎn)（采樣點(diǎn)）的位置離地面 0.8米左右（略高于工作面）。

6.3 在測試報(bào)告中應(yīng)記錄房間溫度、相對濕度、測試狀態(tài)。

6.4 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

6.5不同面積的最少采樣點(diǎn)數(shù)目見表1

最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時(shí)，還應(yīng)滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表2

                                 表2

4.6.7采樣次數(shù)：每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次

7 平均菌落數(shù)的計(jì)算：

M=(M1+M2+M3)/N

平均菌落數(shù)   … (1)

式中： M代表平均菌落數(shù)

M_n代表n號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)

N代表培養(yǎng)皿總數(shù)

8 測試步驟8.1 將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。靜態(tài)測試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min以上，動(dòng)態(tài)測試時(shí)培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min。

8.2 采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

8.3 培養(yǎng)不同類型培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度及時(shí)間見下表：

8.4 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。

8.5 用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5-10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。

9 測試要點(diǎn)

9.1 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。

9.2 采取一切措施防止人為對樣本的污染。

9.3 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用投射光于平皿背面或正面仔細(xì)觀察不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。

9.4 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。

9.5對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。

10、記錄測試報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：

1、測試者的名稱和地址，測試日期。

2、測試依據(jù)。

3、被測潔凈室的平面位置

4、有關(guān)測試儀器及其測試方法的描述：包括測試環(huán)境條件，采樣點(diǎn)數(shù)目及布置圖，測試次數(shù)，或可能存在的測試方法的變更，測試儀器的檢定證書等，若為動(dòng)態(tài)測試，則還應(yīng)記錄現(xiàn)場操作人員數(shù)量及位置，現(xiàn)場設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)量及位置。

5、測試結(jié)果：包括所有統(tǒng)計(jì)計(jì)算資料。

11、結(jié)果評定：

1、每個(gè)測點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。

2、在靜態(tài)測試時(shí)，若某測點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。